在基因功能研究中,siRNA和miRNA是极为有效的工具。siRNA(小干扰RNA)是一种人工合成的双链RNA分子,通常长度为19至23个核苷酸。它通过特异性结合并降解细胞内的目标mRNA,从而实现基因沉默,抑制特定基因的表达。相比之下,miRNA(微小RNA)是机体内源性产生的长度约22个核苷酸的非编码单链RNA分子,能够通过与mRNA的3'非翻译区(3'UTR)部分互补结合来调控基因表达。
在基因功能研究、疾病机制探索以及药物靶点发现中,siRNA和miRNA的转染技术具有重要意义。然而,在实际操作中,细胞毒性和转染体系等问题常常导致转染效果不佳。那么,如何提高转染的效率呢?以下是一些可行的措施:
1. 确保siRNA或miRNA的高纯度
确保所使用的siRNA经过PAGE纯化和脱盐处理,这对于提升转染效率至关重要。
2. 监测细胞状态
细胞的状态对转染结果有直接影响。一般来说,细胞密度应达到70%-80%,并保持良好的生长活力,以避免较大的细胞毒性。
3. 避免RNA降解
在整个实验过程中,使用无RNA酶和无热原性的材料(如离心管、枪头和缓冲液),以保护RNA不被降解。
4. 进行转染试剂与RNA比例的预实验
不同细胞系对转染试剂的敏感度存在差异,需要通过预实验摸索最佳的RNA浓度,以确保高转染效率。
5. 选择无血清或低血清培养环境
试着使用无血清或低血清培养基,以避免转染试剂与RNA的结合受到影响,从而改善转染效果。
6. 选择适合的转染试剂
不同细胞对转染试剂的适应性不同,应根据文献或以往经验选择合适的转染试剂,提高实验成功率。
为了解决转染效率低的问题,尊龙凯时推出了一款专门针对siRNA和miRNA转染的体外转染试剂。该试剂在多种细胞系中表现出色,能够实现超过90%的高转染效率,并克服了脱靶效应。通过精心设计,该产品不仅具备极低细胞毒性,还适用于多种难以转染的悬浮细胞系,确保您的基因研究顺利进行。
总体来看,使用
尊龙凯时的特制转染试剂,不仅能够提升转染效率,降低细胞损伤,还能为您的实验提供更可靠的结果,助力基因研究的进展。