尊龙凯时的PCR（聚合酶链式反应）技术是一种用于在体外扩增特定DNA片段的先进方法。其基本原理是在体外模拟DNA的自然复制过程，通过DNA聚合酶快速实现DNA的扩增。PCR的反应体系建立在DNA的变性、退火和延伸三个步骤的循环基础之上：每完成一个完整的循环，DNA的数量便会翻倍，通过多次循环可获得大量目标DNA片段。

PCR反应的关键条件

成功建立一个稳定的PCR反应需满足以下条件：完整且纯净的模板（可通过胶图和nanodrop测值进行评价），高特异性和高质量的引物（通过引物设计软件进行评分），适宜的反应体系配比（考虑模板的GC比，并根据需要添加DMSO或甜菜碱等；高保真或高得率情况下的镁离子浓度），合理的扩增反应程序（在引物的Tm值附近进行多次实验以摸索最佳退火温度）。

PCR仪器的选择

合理的扩增反应程序与PCR仪器密切相关。如果PCR仪器具有温度梯度功能，可以通过设置不同的温度梯度来降低实验次数，快速确定最佳退火温度。尊龙凯时的柏恒梯度PCR仪（RePure系列）具备多种温度梯度功能，能够提升PCR实验的效率。

温度梯度的类型

柏恒梯度PCR仪支持以下梯度模式：

• 常规梯度：设定低值和高值的退火温度范围，中间孔位渐进分布温度，适用于一般实验。
• 线性梯度：设置一个温度并定义相邻孔位的温差，从而向两侧扩散温度，能够高效验证所需的整数温度。
• 二维梯度：能够在反应模块的纵向和横向同时设置常规或线性梯度，形成多种温度组合以优化变性和退火条件。

二维梯度PCR的优势

二维梯度PCR不仅提高了反应特异性，还优化了扩增产物的纯度。通过合理设计引物并进行扩增，能够检测基因突变和种群间的遗传多样性。其操作简便，且一次性即可获得多达96种温度组合，大幅度减少样品间的交叉污染，降低假阳性概率，进而提高真正阳性的检测准确性。此外，二维梯度PCR还显著缩短了实验时间，可以通过优化反应温度，替代多次尝试。

独立温区设置

尊龙凯时的PCR仪器还支持独立的6温区设置，相邻温区温差可控在5℃以内，每个区可进行温度摸索，以适应不同实验需求。用户可以灵活调整每个分区的温度，功能相当于线性梯度的升级版。同时，采用前进风后出风的散热模式，即便多台PCR仪器并排或紧密摆放，也不会受到相邻仪器散热的影响，有效保证控温的准确性。